陳美琪在十六歲那一年，TVB正在招收電視藝員，她報名了并順利錄取。她1972年從無線電視藝員訓(xùn)練班畢業(yè)后加入無線，在那里演過《
絕代雙驕》、《刑事偵緝檔案》、《鑒證實錄》。
1978年從訓(xùn)練班畢業(yè)，正式開始了她的演藝生涯。1978年，陳美琪出演了第一部TVB116集長篇電視劇《強(qiáng)人》，協(xié)同周潤發(fā)而扮演香惠芝的角色。
1988年在《絕代雙驕》飾冷傲的移花宮主，白衣飄飄的形象讓人難忘，與梁朝偉、吳岱融合作。1989年陳美琪演繹了《
連城訣》的凌霜華和1994年《方世玉與乾隆皇》的苗翠花。
1990年，陳美琪參演TVB電視劇版《奇幻人世間》飾演白蛇白素素，在劇中，白蛇顛覆了溫柔多情的形象，變?yōu)檎加杏麖?qiáng)，為達(dá)到目的不擇手段的壞女人，悲情的角色、矛盾的人物心理讓陳美琪的表演有很大的發(fā)揮空間。1990年12月在翡翠臺首播童年。同年出演TVB單元劇《帝女情未了》飾周世顯。
1992年因出演《
新白娘子傳奇》，讓她紅遍內(nèi)地大江南北，繼而讓內(nèi)地觀眾開始對她認(rèn)識，成為90年代在內(nèi)地走紅的香港女明星之一。陳美琪一直被稱為“最經(jīng)典的青蛇”。
1994-1998年拍攝1-3部《刑事偵輯檔案》飾高敏，1-2部《鑒證實錄》飾聶寶意。1996年拍攝《900重案追兇》，是繼小青之后看的第二個鮮明、迥異的角色。
陳美琪在1998-2007年間基本處于隱退年限。
陳美琪在事業(yè)發(fā)展高峰之際，拍完連續(xù)劇《
抉擇》之后便結(jié)婚?；楹箨惷犁鞯鲅菟嚱纾瑫r報讀研修東亞大學(xué)的專業(yè)課程，1987年時獲得工商管理碩士學(xué)位。
近年逐漸回歸家庭生活的陳美琪仍活躍于內(nèi)地的演藝圈，2004年擔(dān)任CCTV-6嘉賓主持。2006年7月至8月陸續(xù)在北京、上海、天津開展了《我的野蠻繼母》書籍的簽售會。9月陳美琪做客北方網(wǎng)《明星面對面》視頻訪談節(jié)目。離開TVB后，已有七、八年未曾再拍電視劇的她，10月出演了由CCTV與TVB合拍的紀(jì)念香港回歸十周年的《
風(fēng)云歲月》，扮演佘詩曼（阿佘）的“母親”衛(wèi)長萍飾演角色衛(wèi)長萍。
2009年1月7日，陳美琪在上海發(fā)行個人首張唱片《落玫戀》圓了她多年的唱歌夢想。而歌曲《西湖雨又風(fēng)》便是要續(xù)當(dāng)年《新白娘子傳奇》之后小青的故事。9月世界小姐廣東組委會正式向陳美琪發(fā)出邀請，由其擔(dān)任世界小姐廣東賽區(qū)總決賽評委之一。
2011年在澳門大學(xué)三十周年校慶之際，因飾演《新白娘子傳奇》“小青”一角，而深受觀眾喜愛的澳門大學(xué)校友陳美琪女士將應(yīng)澳門大學(xué)研究生會邀請，擔(dān)任「時代大講堂」主講嘉賓，分享她的不平凡經(jīng)歷。
2013年陳美琪、趙雅芝以及葉童三人以“新白組合”亮相江蘇衛(wèi)視春節(jié)聯(lián)歡晚會，參加現(xiàn)場活動并同臺獻(xiàn)唱。
